非蛋白质巯基测试盒实验科研

非蛋白质巯基测试盒实验科研

测定意义：生物体内巯基主要包括非蛋白质巯基和蛋白质巯基。巯基化合物在体内具有重要的解毒功能，对生物体的自我调节具有非常重要的生理意义。

测定原理：巯基基团与5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸（DTNB）反应，生成黄色化合物，在412nm处有最大吸收峰。

需要的仪器，耗材:天平、研钵、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和甲醇。

非蛋白质巯基测试盒实验科研

样本处理

1．动物、植物组织：称取约 0.1g，加入 1mL 的提取液，制备成 10%的匀浆，10000g，常温离心 10min，取 上清待测。

2．细胞或细菌：按照细胞数量（10 4个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）然后 10000g，常温离心 10min， 取上清置冰上待测。

3．血清（浆），培养液：向 0.1mL 血清（浆）或培养液中加入 1mL 提取液，10000g，常温离心 10min，取上 清待测。