上海仁捷生物-猪 KL-6 ELISA试剂盒检测方法

猪Ⅱ型肺泡细胞表面抗原（KL-6）试剂盒（ELISA）

操作步骤

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

实验结果计算

以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。

试剂盒性能

• 检测范围：25 IU/mL–800 IU/mL。
• 灵敏度：zui低检测浓度小于1.0IU/mL。
• 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
• 重复性：板内变异系数小于10%，板间变异系数小于15%。

试剂盒组成

备注：

1.标准品浓度依次为：800、400、200、100、50、25IU/mL

2. 经过大量正常标本检验，标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内，实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过zui大标准品浓度时，可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。

l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中猪Ⅱ型肺泡细胞表面抗原（KL-6）的含量。

l有效期：6个月

l保存条件：2-8℃