原装进口elisa试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠游离脂肪酸(FFA)水平。用纯化的小鼠游离脂肪酸(FFA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入游离脂肪酸(FFA),再与HRP标记的游离脂肪酸(FFA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成醉终的黄色。颜色的深浅和样品中的游离脂肪酸(FFA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠游离脂肪酸(FFA)浓度。
原装进口elisa试剂盒的问题解析:
1、试剂的选择:选择优良试剂大家都是知道的,但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻。
2、加样中可能遇到的问题:在做血清或是血浆用于检测试剂的时候,会碰到血清血浆不好分离的情况,这个时候的解决办法是先放在常温中1到2小时,然后在进行离心处理
3、洗板时容易造成误差:因为洗板是人工洗的,所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的,这个时候带有主观色彩,所以多清洗几次,还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动
4、显色问题: 使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长,都有可能造成显色剂不显色。所以在进行显色反应的时候,要先查看显色剂本身的情况
5、终止反应:在加终止剂的时候由于倾倒速度快,差生气泡,造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒
6、读板:读板的时候首先应该保证板的清洁干净