更新时间:2021-07-28
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仁捷生物ELISA检测试剂盒显色淡,灵敏度偏低是什么原因,小编帮您找一下原因:
以下几点,请注意看哦
问题 |
序号 |
可能原因 |
解决方法 |
显色淡,灵敏度偏低 |
1 |
试剂盒未充分平衡 |
试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃) |
2 |
样品不适合做ELISA检测 |
样品一般选择培养上清、血清、血浆。其他样品形式可能不适合做ELISA检测或者需要优化检测的条件(例如稀释液的成分) |
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3 |
酶标板在贮存或洗后拍干时过分干燥 |
防止板过于干燥 |
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4 |
包被抗体遭到破坏 |
操作温和,移液枪不能碰到孔底 |
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5 |
样本和抗体孵育条件不合适 |
按照说明书条件,建议孵育过程中全程振荡孵育。 |
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6 |
洗涤浸泡时间过长 |
按照说明书操作。勿人为增加浸泡时间; |
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7 |
偶联HRP试剂污染 |
弃去试剂,重新配置 |
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8 |
错误的稀释偶联HRP试剂 |
弃去试剂,重新配置 |
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9 |
TMB底物孵育时间过短,因非人为因素影响,需要优化孵育时间 |
确定合适的孵育时间:人为判定-最高浓度的标准品出现深蓝色;S4-5有淡蓝色;机器判定620 nm波长下测定OD值达到0.6-0.65 |
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10 |
样本浓度过高或存在基质效应 |
建议做不同稀释倍数,确认样本最佳稀释倍数。 |
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11 |
酶标仪滤光片设置有问题或者波长选择不对 |
确认仪器设置及选择正确的波长检测。 |
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12 |
酶标板不适合做ELISA |
不能使用细胞培养板,建议使用ELISA专用高吸附力板子。 |