更新时间:2021-03-25
浏览次数:1773
测定意义:POD(EC 1.11.1.7)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可催化*氧化酚类和胺类化合物,具有消除*和酚类、胺类毒性的双重作用。
测定原理:POD催化H2O2氧化特定底物,在470nm有特征光吸收。
需要的仪器,耗材:可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
样本处理
1、细菌、细胞或组织样本的制备 收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或 细胞(功率 20%,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆;8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样本:直接检测。